期刊简介

               本刊是由卫生部主管,中国康复医学会、华西医科大学附属第一医院主办,中国修复重建外科杂志编辑委员会编辑出版的跨学科的医学专业性学术期刊。主要刊登骨科、手外科、显微外科、整形外科、颌面外科、普外科、泌尿外科、神经外科、妇产科、五官科等各临床学科、研究室,无论是采用手术方法进行组织、器官的移植与移位,采用生物制品或非生物制品进行植入或替代,以及采用非手术方法等,进行组织结构的修复、重建功能、改善外形等有关的学术论文、临床经验总结、基础研究、有前瞻性见解的个案报道,有关的新技术、新疗法、经验教训、专题讲座、专题讨论、国外最新文献摘要等。                

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  • 杂志名称:中国修复重建外科杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
  • 主办单位:中国康复医学会,四川大学
  • 国际刊号:1002-1892
  • 国内刊号:51-1372/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:四川省首届科技期刊评比编辑加工奖期刊收录:JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
中国修复重建外科杂志2018年第03期

H2O2下调miR-21对MC3T3-E1细胞成骨分化影响的研究

彭建强;黄年盛;黄胜;李亮平;凌泽民;靳松;黄爱军;林昆;邹学农

关键词:H2O2, 氧化应激, miR-21, 成骨分化, MC3T3-E1细胞
摘要:目的 探讨H2O2诱导的miR-21下调对MC3T3-E1细胞成骨分化的作用及机制.方法 取MC3T3-E1细胞系,培养传至第7代进行实验.取MC3T3-E1细胞,以不同浓度H2O2(0、40、80、160、320μmol/L)培养,经实时荧光定量PCR检测miR-21表达、MTS法检测细胞活性,选择H2O2合适实验浓度.取MC3T3-E1细胞分为空白对照组(A组)、H2O2组(B组)、成骨诱导组(C组)、H2O2+成骨诱导组(D组),对应培养后实时荧光定量PCR检测miR-21表达以及成骨标志基因Runx2、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)及Ⅰ型胶原蛋白(collagen type Ⅰ alpha 1,Col1a1)表达,Western blot检测磷酸酶与张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog,PTEN)蛋白表达,茜素红染色观察细胞外钙基质沉积情况,分析H2O2对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响.然后再取MC3T3-E1细胞,分为H2O2组(A1组)、H2O2+成骨诱导组(B1组)、H2O2+miR-21抑制剂+成骨诱导组(C1组)、H2O2+miR-21抑制剂阴性对照+成骨诱导组(D1组);以及H2O2组(A2组)、H2O2+成骨诱导组(B2组)、H2O2+siRNA-PTEN阴性对照+成骨诱导组(C2组)、H2O2+siRNA-PTEN+成骨诱导组(D2组);对应培养后检测成骨标志基因(Runx2、OPN、Col1a1)表达以及细胞外钙基质沉积情况,分析下调miR-21或沉默PTEN对细胞成骨分化的影响.结果 结合实时荧光定量PCR检测以及MTS法结果,选择160μmol/LH2O2进行实验.第1、2周B组miR-21相对表达量低于A组(P<0.05),D组低于C组(p<0.05);第2周C组PTEN蛋白相对表达量均低于A、D组(P<0.05);第1、2周D组Runx2、OPN及Col1a1 mRNA相对表达量均低于C组(P<0.05),茜素红染色显示D组钙基质沉积少于C组.C1组PTEN蛋白相对表达量高于D1组(P<0.05);第1、2周B1、D1组Runx2、OPN mRNA相对表达量均高于C1组(P<0.05),第2周B1、D1组Col1a1 mRNA均高于C1组(P<0.05);茜素红染色显示C1组钙基质沉积少于B1、D1组.第1周D2组OPN、Col1a1 mRNA相对表达量高于B2、C2组(p<0.05),第3周茜素红染色显示D2组钙基质沉积明显多于B2、C2组.结论 H2O2抑制MC3T3-E1成骨分化可能与miR-21下调有关.