期刊简介

               本刊是由卫生部主管,中国康复医学会、华西医科大学附属第一医院主办,中国修复重建外科杂志编辑委员会编辑出版的跨学科的医学专业性学术期刊。主要刊登骨科、手外科、显微外科、整形外科、颌面外科、普外科、泌尿外科、神经外科、妇产科、五官科等各临床学科、研究室,无论是采用手术方法进行组织、器官的移植与移位,采用生物制品或非生物制品进行植入或替代,以及采用非手术方法等,进行组织结构的修复、重建功能、改善外形等有关的学术论文、临床经验总结、基础研究、有前瞻性见解的个案报道,有关的新技术、新疗法、经验教训、专题讲座、专题讨论、国外最新文献摘要等。                

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  • 杂志名称:中国修复重建外科杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
  • 主办单位:中国康复医学会,四川大学
  • 国际刊号:1002-1892
  • 国内刊号:51-1372/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:四川省首届科技期刊评比编辑加工奖期刊收录:JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
中国修复重建外科杂志2018年第06期

不同代次髓核细胞生物学特性的比较研究

陈琪;石芳芳;杨曦;刘立岷;宋跃明

关键词:髓核细胞, 细胞退变, 细胞凋亡, 兔
摘要:目的 通过兔髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)自然传代培养退变模型,观察不同代次NPCs 生物学特性.方法 取 6~8 周龄新西兰大白兔(体质量 1.5~2.5 kg)胸腰椎节段髓核组织,采用酶消化法获取原代 NPCs,计为 P0 代;胰蛋白酶消化法传代获取第 1~3 代 NPCs,依次计为 P1、P2、P3 代.倒置相差显微镜观察各代 NPCs 形态特征;膜联蛋白 Ⅴ/碘化丙啶双染流式细胞术检测细胞凋亡率;免疫细胞荧光染色法和Western blot 检测各代 NPCs 的缺氧诱导因子 1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)、聚集蛋白多糖(Aggrecan)、Ⅱ 型胶原、基质金属蛋白酶 2(matrix metalloproteinases 2,MMP-2)表达.结果 NPCs 形态从 P0 代的三角形、多角形、多边形逐渐向 P3 代的梭形变化,细胞体积变大,含特征性空泡细胞逐渐消失,细胞生长倍增时间延长.P0~P3 代兔 NPCs 细胞凋亡率分别为 5.47%±0.91%、13.77%±2.42%、33.46%±1.82%、38.76%±1.50%,随着培养代数增加,细胞凋亡率明显增加,比较差异均有统计学意义(P<0.05).免疫细胞荧光染色示,随着培养代数的增加,HIF-1α、Ⅱ 型胶原和 Aggrecan 荧光强度逐渐减小,MMP-2 荧光强度逐渐增加.Western blot 检测示, HIF-1α 蛋白相对表达量在 P0 代较高,P1 代有升高趋势,而后逐渐降低,各代次间比较差异均有统计学意义(P<0.05).Ⅱ 型胶原蛋白相对表达量从 P0~P3 代逐渐降低,各代次间比较差异均有统计学意义(P<0.05).Aggrecan 蛋白相对表达量从 P0~P2 代逐渐降低,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);P2 代与 P3 代间比较差异无统计学意义(P>0.05).MMP-2 蛋白相对表达量在 P3 代有明显升高,除 P0 代与 P2 代间比较差异无统计意义(P>0.05)外,其余各代次间比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 自然传代培养法可成功构建 NPCs 退变模型,退变时细胞形态变化、凋亡增加,细胞合成代谢减慢,分解代谢加快.