期刊简介
本刊是由卫生部主管,中国康复医学会、华西医科大学附属第一医院主办,中国修复重建外科杂志编辑委员会编辑出版的跨学科的医学专业性学术期刊。主要刊登骨科、手外科、显微外科、整形外科、颌面外科、普外科、泌尿外科、神经外科、妇产科、五官科等各临床学科、研究室,无论是采用手术方法进行组织、器官的移植与移位,采用生物制品或非生物制品进行植入或替代,以及采用非手术方法等,进行组织结构的修复、重建功能、改善外形等有关的学术论文、临床经验总结、基础研究、有前瞻性见解的个案报道,有关的新技术、新疗法、经验教训、专题讲座、专题讨论、国外最新文献摘要等。
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首页>中国修复重建外科杂志

- 杂志名称:中国修复重建外科杂志
- 主管单位:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
- 主办单位:中国康复医学会,四川大学
- 国际刊号:1002-1892
- 国内刊号:51-1372/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:四川省首届科技期刊评比编辑加工奖期刊收录:JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
TGF-β1联合VEGF对人羊膜间充质干细胞向韧带成纤维细胞体外分化作用的研究
邹刚;李豫皖;金瑛;朱喜忠;杨继滨;王胜民;尤奇;熊华章;刘毅
关键词:人羊膜间充质干细胞, 韧带成纤维细胞, TGF-β1, VEGF, 组织工程韧带
摘要:目的 探讨人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)是否具有MSCs特性,以及经TGF-β1和VEGF联合诱导后是否具有向韧带成纤维细胞分化的能力.方法 取自愿捐赠的足月产妇胎盘,采用胰蛋白酶胶原酶联合消化法分离培养hAMSCs,流式细胞术检测hAMSCs表型分子,免疫荧光染色检测hAMSCs其角蛋白-19 (cytokeratin-19,CK-19)和波形蛋白表达情况.取第3代hAMSCs,分别使用含TGF-β1和VEGF的L-DMEM/F12成韧带或纤维细胞诱导培养基(实验组)和普通L-DMEM/F12培养基(对照组)培养,细胞增殖-毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测两组细胞增殖能力;培养5、10、15d分别采用免疫荧光染色及实时荧光定量PCR检测韧带及血管生成相关特异性蛋白和基因表达.结果 倒置相差显微镜观察示hAMSCs呈单层贴壁生长;流式细胞术结果示hAMSCs表达MSCs表型分子;免疫荧光染色示hAMSCs高表达波形蛋白、低表达CK-19;hAMSCs具有向成骨、成软骨及成脂细胞分化的能力.CCK-8法检测示,7d时两组细胞均达增殖高峰,实验组细胞增殖能力于7d后显著高于对照组(P<0.05).免疫荧光染色示,培养5、10、15d时实验组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤维连接蛋白(Fibronectin)、细胞连接素(Tenascin-C)表达染色均较对照组增强.实时荧光定量PCR结果示,随时间延长实验组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、Fibronectin、α-肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、VEGF mRNA相对表达量均逐渐上调(P<0.05).除培养5d两组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、VEGF mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)外,其余各时间点实验组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、Fibronectin、α-SMA和VEGF mRNA相对表达量均显著高于对照组(P<0.05).结论 hAMSCs具有MSCs特征,且体外增殖能力良好,可作为组织工程种子细胞来源;体外诱导后韧带成纤维细胞及血管生成相关特异性基因表达上调,韧带成纤维细胞特异性蛋白分泌增加,TGF-β1联合VEGF可作为构建组织工程韧带的生长因子选择.
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