期刊简介
本刊是由卫生部主管，中国康复医学会、华西医科大学附属第一医院主办，中国修复重建外科杂志编辑委员会编辑出版的跨学科的医学专业性学术期刊。主要刊登骨科、手外科、显微外科、整形外科、颌面外科、普外科、泌尿外科、神经外科、妇产科、五官科等各临床学科、研究室，无论是采用手术方法进行组织、器官的移植与移位，采用生物制品或非生物制品进行植入或替代，以及采用非手术方法等，进行组织结构的修复、重建功能、改善外形等有关的学术论文、临床经验总结、基础研究、有前瞻性见解的个案报道，有关的新技术、新疗法、经验教训、专题讲座、专题讨论、国外最新文献摘要等。
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首页>中国修复重建外科杂志
- 杂志名称：中国修复重建外科杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
- 主办单位：中国康复医学会,四川大学
- 国际刊号：1002-1892
- 国内刊号：51-1372/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：四川省首届科技期刊评比编辑加工奖期刊收录：JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
miRNA219-5P靶向调控Smad4表达影响TGF-β1诱导肌腱成纤维细胞纤维化的研究
阮洪江；范大鹏；陈帅；李旭军；范存义
关键词：肌腱粘连, 肌腱成纤维细胞, miRNA219-5P, Smad4, 纤维化
摘要：目的 探讨miRNA219-5P (miR219-5P)调控Smad4在TGF-β1诱导人肌腱成纤维细胞(tendon derived fibroblasts,TDFs)纤维化过程中的作用.方法 取患者自愿捐赠的肌腱组织分离培养TDFs,取第3代细胞进行实验.化学合成miR219-5P类似物(mimics)、阻遏物(inhibitor)及阴性对照序列,分别转染TDFs 48 h后,采用实时定量PCR及Western blot法分别检测miR219-5P基因及Smad4蛋白表达情况;以正常细胞作为空白对照.信息学软件预测miR219-5P与Smad4基因3'UTR区结合位点,构建Smad4预测基因3'UTR-PGL3重组质粒,构建野生型及突变型报告基因表达载体,并通过荧光素酶报告基因实验进行靶位验证.取正常及转染后TDFs,采用TGF-β1诱导细胞发生纤维化,于培养24、48、72 h采用细胞计数试剂盒8法检测细胞增殖活性变化,72 h时采用Western blot法检测纤维化相关蛋白指标.结果 miR219-5P mimics转染TDFs可明显上调miR219-5P表达、下调Smad4蛋白表达,而miR219-5P inhibitor抑制细胞内miR219-5P表达、增加Smad4蛋白表达,与空白对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).荧光素酶实验显示,与pGL3-WT-Smad4转染组比较,pGL3-WT-Smad4+mimics转染组细胞内荧光素酶活性降低、pGL3-WT-Smad4+inhibitor转染组活性增强(P＜0.05);而pGL3-MT-Smad4+mimics转染组、pGL3-MT-Smad4+inhibitor转染组组间比较无明显变化(P＞0.05).与空白对照组比较,TGF-β1诱导培养72 h后细胞增殖活性明显增强(P＜0.01),同时上调细胞纤维化相关蛋白指标的表达(P＜0.01);与直接诱导组比较,miR219-5P过表达且诱导组TDFs细胞增殖活性和纤维化蛋白指标升高趋势得到抑制,而miR219-5P表达抑制且诱导组细胞增殖活性和纤维化蛋白指标则进一步增强,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 miR219-5P可通过抑制其靶基因Smad4表达,显著抑制TGF-β1诱导TDFs纤维化.
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