期刊简介

               本刊是由卫生部主管,中国康复医学会、华西医科大学附属第一医院主办,中国修复重建外科杂志编辑委员会编辑出版的跨学科的医学专业性学术期刊。主要刊登骨科、手外科、显微外科、整形外科、颌面外科、普外科、泌尿外科、神经外科、妇产科、五官科等各临床学科、研究室,无论是采用手术方法进行组织、器官的移植与移位,采用生物制品或非生物制品进行植入或替代,以及采用非手术方法等,进行组织结构的修复、重建功能、改善外形等有关的学术论文、临床经验总结、基础研究、有前瞻性见解的个案报道,有关的新技术、新疗法、经验教训、专题讲座、专题讨论、国外最新文献摘要等。                

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  • 杂志名称:中国修复重建外科杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
  • 主办单位:中国康复医学会,四川大学
  • 国际刊号:1002-1892
  • 国内刊号:51-1372/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:四川省首届科技期刊评比编辑加工奖期刊收录:JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
中国修复重建外科杂志2016年第09期

氧化应激活化RAW264.7巨噬细胞对MC3T3-E1成骨细胞迁移、增殖及成骨基因表达影响的实验研究

彭建强;易志新;武明鑫;黄爱军;林昆;靳松;李亮平;黄胜;罗嘉全

关键词:氧化应激, H2O2, MC3T3-E1细胞, RAW264.7细胞, 成骨分化
摘要:目的 探索氧化应激活化RAW264.7巨噬细胞对MC3T3-E1成骨细胞迁移、增殖及成骨基因表达的影响.方法 取MC3T3-E1细胞系及RAW264.7细胞系,分别培养传至第7代进行实验.利用不同浓度(0、25、50、100 μmol/L)H2O2刺激RAW264.7细胞,MTS检测培养1、3、6h后细胞增殖率,采用超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)检测试剂盒检测培养1h时细胞内SOD含量,筛选H2O2引起RAW264.7细胞氧化应激的佳浓度和作用时间,并对应收集RAW264.7细胞(加或不加H2O2处理)24h上清液.取第7代MC3T3-E1细胞,分别以100μL无血清DMEM培养基(A组)、未氧化应激RAW264.7细胞上清液(B组)、氧化应激RAW264.7细胞上清液(C组)培养,采用MTS法检测细胞增殖情况,行划痕实验检测细胞迁移能力;另取细胞分为4组,空白对照组,以完全培养基培养;阳性对照组,以含50μg/mL维生素C及10 nmol/L的β甘油磷酸钠的完全培养基进行成骨诱导培养;正常对照组,以含50 μg/mL维生素C及10 nmol/L的β甘油磷酸钠的完全培养基及未氧化应激RAW264.7细胞上清液培养;实验组,以含50 μg/mL维生素C及10 nmol/L的β甘油磷酸钠的完全培养基及氧化应激RAW264.7细胞上清液培养.培养3、7、14d,RT-PCR检测细胞内成骨相关基因ALP、Runx2、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、Ⅰ型胶原蛋白(collagen type Ⅰ,COL-Ⅰ)、骨钙素(osteocalcin,oc)、骨唾液酸蛋白(bone sialoprotein,BSP)表达水平.结果 MTS和SOD检测结果显示:25 μmol/L H2O2刺激1h为构建RAW264.7细胞氧化应激模型佳浓度和作用时间.细胞生长检测显示:1、2、3dB、C组细胞增殖率显著高于A组(P<0.05),C组低于B组,其中2、3d时组间比较差异有统计学意义(P<0.05).划痕实验显示12 h时B、C组MC3T3-E1细胞迁移显著快于A组,C组快于B组,细胞迁移距离比较差异有统计学意义(P<0.05);24 h时B、C组划痕已被细胞爬满.除3d外,实验组各时间点ALP、Runx2、OC、BSP mRNA相对表达量均较阳性对照组明显降低,OPN、COL-Ⅰ mRNA相对表达量较空白对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 H2O2构建RAW264.7细胞氧化应激模型的佳浓度为25μmol/L、作用时间为1h.氧化应激活化RAW264.7巨噬细胞上清液能促进MC3T3-E1成骨细胞迁移、抑制其增殖及成骨相关基因的表达.