期刊简介
本刊是由卫生部主管，中国康复医学会、华西医科大学附属第一医院主办，中国修复重建外科杂志编辑委员会编辑出版的跨学科的医学专业性学术期刊。主要刊登骨科、手外科、显微外科、整形外科、颌面外科、普外科、泌尿外科、神经外科、妇产科、五官科等各临床学科、研究室，无论是采用手术方法进行组织、器官的移植与移位，采用生物制品或非生物制品进行植入或替代，以及采用非手术方法等，进行组织结构的修复、重建功能、改善外形等有关的学术论文、临床经验总结、基础研究、有前瞻性见解的个案报道，有关的新技术、新疗法、经验教训、专题讲座、专题讨论、国外最新文献摘要等。
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首页>中国修复重建外科杂志
- 杂志名称：中国修复重建外科杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
- 主办单位：中国康复医学会,四川大学
- 国际刊号：1002-1892
- 国内刊号：51-1372/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：四川省首届科技期刊评比编辑加工奖期刊收录：JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
滑膜间充质干细胞成纤维软骨分化条件初步探索
符培亮；丛锐军；陈松；张雷；丁喆如；周琦；李林涛；许震宇；吴宇黎
关键词：滑膜间充质干细胞, 纤维软骨细胞, 正交实验, 分化条件
摘要：目的 采用正交实验研究滑膜间充质干细胞(synovial derived MSCs,SMSCs)成纤维软骨分化的条件.方法 5只成年新西兰白兔,活检取滑膜组织.贴壁法获取SMSCs后采用流式细胞仪及成脂、成骨、成软骨诱导分化鉴定.根据预实验与文献综述寻找与SMSCs成纤维软骨分化可能相关的条件,采用缺失实验初筛必要条件后,TGF-β1、BMP-2、地塞米松、脯氨酸、柠檬酸(ascorbic acid,ASA)、丙酮酸、胰岛素+转铁蛋白+亚硒酸预混液、牛血清白蛋白、bFGF、间断静水压、BMP-7、IGF纳入正交实验,采用SPSS18.0统计软件设计L60 (212)正交实验及表头,定义2水平条件,在SMSCs-三维小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)支架上诱导成纤维软骨分化.使用流式细胞仪计数,检测CD151+/CD44+细胞并记录SMSCs向纤维软骨分化的转换率,采用免疫组织化学染色,结合细胞形态、甲苯胺蓝染色、半定量RT-PCR检测SOX9、聚集蛋白聚糖、Ⅰ型胶原(collagentype Ⅰ,Col Ⅰ)、ColⅡ、ColⅨ基因表达,进一步验证结果.检验指标rate是CD151+/CD44+细胞与高表达Col Ⅰ细胞的比例乘积.同时采用PicoGreen Assay测量细胞总DNA量,以反映细胞扩增情况.正交实验结果采用直观观察和主体间方差分析方法,考虑部分因子间的1阶交互作用,组间差异采用LSD和q检验验证,使用Ⅲ型平方和校正模型,检验水准α=0.05.结果 实验获取的细胞为SMSCs,细胞倍增时间为28 h.成纤维软骨分化过程中SMSCs-三维SIS支架体积5d倍增,14d后得到甲苯胺蓝染色阳性的细胞-支架复合物.正交实验结果直观分析示,TGF-β1对成纤维软骨分化转化率的作用明显,BMP-7采用水平2有利于得到更高的转化率,但与BMP-2存在交互作用;其余第1区组水平值加和高于22.5的因子有DEX、ASA、ITS、转铁蛋白、bFGF,模型的相关性好.方差分析校正模型P=0.000,能够满足实验设计;截距P=0.000,说明各因子对因变量影响差异不完全相同.TGF-β1、ASA、bFGF、IGF对因变量调控作用较其他因子显著,差异有统计学意义,与直观观察结果相似.结论 TGF-β1、ASA、bFGF、IGF显著影响SMSCs成纤维软骨分化,通过合理调整上述因子浓度,可显著提高SMSCs成纤维软骨分化转化率;精确的调控条件和调控机制有待进一步探索.
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