期刊简介
本刊是由卫生部主管，中国康复医学会、华西医科大学附属第一医院主办，中国修复重建外科杂志编辑委员会编辑出版的跨学科的医学专业性学术期刊。主要刊登骨科、手外科、显微外科、整形外科、颌面外科、普外科、泌尿外科、神经外科、妇产科、五官科等各临床学科、研究室，无论是采用手术方法进行组织、器官的移植与移位，采用生物制品或非生物制品进行植入或替代，以及采用非手术方法等，进行组织结构的修复、重建功能、改善外形等有关的学术论文、临床经验总结、基础研究、有前瞻性见解的个案报道，有关的新技术、新疗法、经验教训、专题讲座、专题讨论、国外最新文献摘要等。
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首页>中国修复重建外科杂志
- 杂志名称：中国修复重建外科杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
- 主办单位：中国康复医学会,四川大学
- 国际刊号：1002-1892
- 国内刊号：51-1372/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：四川省首届科技期刊评比编辑加工奖期刊收录：JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
TGF-β3基因转染诱导滇南小耳猪BMSCs向软骨分化的初步研究
王慧建；李彦林；陈建明；王鑫；赵沣凯；曹树海
关键词：软骨组织工程, TGF-β3, BMSCs, 软骨分化, 基因转染, 滇南小耳猪
摘要：目的 观察TGF-β3基因转染滇南小耳猪BMSCs后目的基因的表达和向软骨细胞分化的作用. 方法 以血清5型重组腺病毒(recombinant adenovirus 5,rAd5)构建系统为基因载体,包装为重组腺病毒rAd5-TGF-p3,行双酶切及PCR鉴定.采集2月龄滇南小耳猪(体重12～15 kg)骨髓分离培养制备BMSCs,取第2代细胞用于实验.将实验分为3组,实验组和对照组分别用rAd5-TGF-β3、人腺病毒阴性空病毒载体转染BMSCs,以未转染的BMSCs为空白对照组.流式细胞仪检测转染效率,免疫荧光染色、Westem blot检测各组TGF-β3蛋白表达情况;培养后各时间点倒置相差显微镜观察细胞形态变化,Western blot检测各组Ⅱ型胶原蛋白表达情况. 结果 rAd5-TGF-β3重组腺病毒成功构建并转染BMSCs,在细胞内表达并迅速扩增,免疫荧光显微镜下可观察到强绿色荧光.流式细胞仪检测示转染72 h时病毒达佳转染效果(转染效率为84.86％).免疫荧光染色示,rAd5-TGF-β3转染BMSCs 72 h,细胞质内有明显TGF-β3蛋白表达;转染后7、21 d Western blot检测示,实验组在相对分子质量为30×103处有TGF-β3阳性条带,而对照组和空白对照组均呈阴性.转染后体外培养,倒置相差显微镜下示实验组向软骨细胞分化明显.培养21 d时Western blot检测示,实验组在相对分子质量为130×103处有Ⅱ型胶原阳性条带,对照组和空白对照组均呈阴性. 结论 重组腺病毒rAd5-TGF-β3可成功转染BMSCs,TGF-β3蛋白可稳定表达,并促使BMSCs向软骨细胞方向分化,为软骨缺损修复的局部基因治疗奠定了实验基础.
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