期刊简介
本刊是由卫生部主管，中国康复医学会、华西医科大学附属第一医院主办，中国修复重建外科杂志编辑委员会编辑出版的跨学科的医学专业性学术期刊。主要刊登骨科、手外科、显微外科、整形外科、颌面外科、普外科、泌尿外科、神经外科、妇产科、五官科等各临床学科、研究室，无论是采用手术方法进行组织、器官的移植与移位，采用生物制品或非生物制品进行植入或替代，以及采用非手术方法等，进行组织结构的修复、重建功能、改善外形等有关的学术论文、临床经验总结、基础研究、有前瞻性见解的个案报道，有关的新技术、新疗法、经验教训、专题讲座、专题讨论、国外最新文献摘要等。
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首页>中国修复重建外科杂志
- 杂志名称：中国修复重建外科杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
- 主办单位：中国康复医学会,四川大学
- 国际刊号：1002-1892
- 国内刊号：51-1372/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：四川省首届科技期刊评比编辑加工奖期刊收录：JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
软骨源性形态发生蛋白1转基因细胞片的初步探讨
姚梅；崔颖；王月田；张本；付文举
关键词：软骨组织工程, 细胞片, 软骨源性形态发生蛋白1, BMSCs, 腺病毒基因转染
摘要：目的 探讨软骨源性形态发生蛋白1 (cartilage-derived morphogenetic protein 1,CDMP1)转基因细胞片的构建及其活性鉴定. 方法 取1月龄新西兰白兔骨髓分离培养BMSCs,取第3～6代细胞进行实验.实验分为3组,A组:腺病毒(adenovirus,Ad)-巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)-人CDMP1 (human CDMP1,hCDMP1)-内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site,IRES)-增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)转染BMSCs,B组:Ad-CMV-EGFP(空载体腺病毒)转染BMSCs,C组:未转染的BMSCs.倒置荧光显微镜观察3组细胞荧光表达情况,MTT法检测3组细胞增殖活力.将3组处于对数生长期的细胞接种于温度敏感性6孔板获得细胞片,行形态学及HE染色观察,RT-PCR及Western blot检测3组细胞片hCDMP1和Ⅱ型胶原mRNA及蛋白表达,阿利新蓝染色检测糖胺聚糖(glycosaminoglycans,GAG)表达. 结果 倒置荧光显微镜下观察示转染细胞在72 h表达明亮荧光,转染效率达90％; MTT法检测示,3组细胞生长曲线基本呈S形,培养1～9 d吸光度(A)值比较差异均无统计学意义(P＞0.05).通过温度敏感性6孔板体外可成功收获完整的三维立体细胞片结构,RT-PCR及Western blot检测示,A组细胞片中hCDMP1和Ⅱ型胶原mRNA及蛋白均呈阳性表达,B、C组均为阴性.HE染色和阿利新蓝染色示,A组纤维组织丰富,细胞外基质较多,蓝色异染颗粒多;B、C组细胞外基质相对较少,无明显特异性蓝染颗粒;A组GAG阳性染色面积明显低于B、C 组,灰度值明显高于B、C组(P＜0.05). 结论 hCDMP1基因转染的BMSCs细胞片能表达Ⅱ型胶原和GAG,具有成软骨活性,其克服了传统组织工程中细胞利用率低、支架异质性等缺点,有望构建出致密的组织工程软骨,为软骨组织工程进一步发展提供了新思路.
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