期刊简介

               本刊是由卫生部主管,中国康复医学会、华西医科大学附属第一医院主办,中国修复重建外科杂志编辑委员会编辑出版的跨学科的医学专业性学术期刊。主要刊登骨科、手外科、显微外科、整形外科、颌面外科、普外科、泌尿外科、神经外科、妇产科、五官科等各临床学科、研究室,无论是采用手术方法进行组织、器官的移植与移位,采用生物制品或非生物制品进行植入或替代,以及采用非手术方法等,进行组织结构的修复、重建功能、改善外形等有关的学术论文、临床经验总结、基础研究、有前瞻性见解的个案报道,有关的新技术、新疗法、经验教训、专题讲座、专题讨论、国外最新文献摘要等。                

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  • 杂志名称:中国修复重建外科杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
  • 主办单位:中国康复医学会,四川大学
  • 国际刊号:1002-1892
  • 国内刊号:51-1372/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:四川省首届科技期刊评比编辑加工奖期刊收录:JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
中国修复重建外科杂志2014年第09期

妊娠早期人脐带血管周围细胞的分离培养及定向分化胰岛样细胞的研究

曹玫;张剑波;叶尚勉;李浩;赵建

关键词:妊娠早期, 人脐带血管周围细胞, 拟胚体, 胰岛样细胞, 胰岛素
摘要:目的 研究妊娠早期人脐带血管周围细胞(human umbilical cord perivascular cells,HUCPVC)分离培养条件及定向分化胰岛样细胞能力. 方法 取患者自愿捐赠的妊娠一期(8~12周)脐带组织,体外分离培养妊娠早期HUCPVC,记录传代代数并观察细胞分化情况;采用免疫组织化学染色法检测细胞表面标志物阶段特异性胚胎抗原1(stage-specific embryonic antigen 1,SSEA-1)、SSEA-3、SSEA-4、OCT-4、TRA-1-60和TRA-1-81表达.利用分段培养法(5个阶段)对细胞进行拟胚体诱导和胰岛样细胞定向分化,采用免疫组织化学染色方法检测拟胚体特异标志物甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)、巢蛋白(Nestin)、平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin,SMA)表达,采用葡萄糖刺激胰岛素分泌实验检测胰岛素分泌能力. 结果 成功分离纯化出妊娠早期HUCPVC并可稳定连续传代10代以上,细胞均显著表达干细胞标志物SSEA-3、SSEA-4、OCT-4、TRA-1-60和TRA-1-81,具有分化潜能.经拟胚体体外诱导可形成表面有膜包被的一中空、分层并具有规则球状形态的拟胚体,标志物AFP、Nestin和SMA均呈阳性.可定向分化为独立的胰岛样细胞结构,胰岛素表达阳性;葡萄糖刺激胰岛素分泌实验结果显示,分化的细胞在高糖培养基中的胰岛素含量为(23.2±5.3)mU/L,明显高于低糖培养基中的含量(7.0±0.5)mU/L(t=7.444,P=0.002). 结论 通过分离、传代和诱导,妊娠早期HUCPVC可定向分化为胰岛样细胞结构并分泌胰岛素.