期刊简介
本刊是由卫生部主管，中国康复医学会、华西医科大学附属第一医院主办，中国修复重建外科杂志编辑委员会编辑出版的跨学科的医学专业性学术期刊。主要刊登骨科、手外科、显微外科、整形外科、颌面外科、普外科、泌尿外科、神经外科、妇产科、五官科等各临床学科、研究室，无论是采用手术方法进行组织、器官的移植与移位，采用生物制品或非生物制品进行植入或替代，以及采用非手术方法等，进行组织结构的修复、重建功能、改善外形等有关的学术论文、临床经验总结、基础研究、有前瞻性见解的个案报道，有关的新技术、新疗法、经验教训、专题讲座、专题讨论、国外最新文献摘要等。
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首页>中国修复重建外科杂志
- 杂志名称：中国修复重建外科杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
- 主办单位：中国康复医学会,四川大学
- 国际刊号：1002-1892
- 国内刊号：51-1372/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：四川省首届科技期刊评比编辑加工奖期刊收录：JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
犬脐静脉血管内皮细胞的分离培养与鉴定
胡泉；柴家科；刘玲英；侯玉森；王一贺；李百玲；杨红明
关键词：血管内皮细胞, 脐静脉, 细胞培养, 细胞鉴定, 犬
摘要：目的 建立一种简便、高效的犬脐静脉血管内皮细胞分离方法,并进行培养和鉴定. 方法 无菌条件下取12只新生比格犬脐带共12根,脐带长(13.0±1.5)cm.PBS液冲洗后,各取4根脐带注入1％Ⅰ型胶原酶分别消化脐静脉5、7、10 min后,收集细胞并行锥虫蓝计数；倒置相差显微镜下观察细胞形态,待细胞爬满培养瓶后以1∶2比例传代.取Ⅰ型胶原酶消化7 min获得的第3代细胞,通过免疫荧光染色和流式细胞仪检测细胞中血管假性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)和血小板-内皮细胞黏附分子CD31表达,进行细胞鉴定；MTT检测细胞增殖. 结果 消化5、10 min后未收集到或偶尔收集到血管内皮细胞；消化7 min可见大量血管内皮细胞,培养24 h后细胞呈多角形,随培养时间延长细胞逐渐呈“铺路石”样生长,细胞核较大,多为单核,少数细胞为双核,传代后细胞形态无明显变化.荧光倒置显微镜下观察,培养细胞vWF和CD31表达阳性；流式细胞仪检测示培养细胞vWF阳性表达率为99.0％±0.7％,CD31阳性表达率为98.0％±1.2％,提示培养细胞为血管内皮细胞.MTT检测示,随培养时间延长,血管内皮细胞增殖速度明显提高. 结论 采用酶消化法从犬脐静脉中分离培养血管内皮细胞操作简便,且细胞数量多、纯度高.
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