期刊简介
本刊是由卫生部主管，中国康复医学会、华西医科大学附属第一医院主办，中国修复重建外科杂志编辑委员会编辑出版的跨学科的医学专业性学术期刊。主要刊登骨科、手外科、显微外科、整形外科、颌面外科、普外科、泌尿外科、神经外科、妇产科、五官科等各临床学科、研究室，无论是采用手术方法进行组织、器官的移植与移位，采用生物制品或非生物制品进行植入或替代，以及采用非手术方法等，进行组织结构的修复、重建功能、改善外形等有关的学术论文、临床经验总结、基础研究、有前瞻性见解的个案报道，有关的新技术、新疗法、经验教训、专题讲座、专题讨论、国外最新文献摘要等。
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首页>中国修复重建外科杂志
- 杂志名称：中国修复重建外科杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
- 主办单位：中国康复医学会,四川大学
- 国际刊号：1002-1892
- 国内刊号：51-1372/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：四川省首届科技期刊评比编辑加工奖期刊收录：JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
小干扰RNA沉默TNF-α表达并抑制骨溶解的实验研究
余博；郝绍文；孙首选；郭浩辉；杨小春；马晓军；金群华
关键词：关节置换, 骨溶解, 基因治疗, TNF-α, 重组腺病毒, 小干扰RNA, 小鼠
摘要：目的 通过构建沉默TNF-α的重组腺病毒并观察其对小鼠假体骨溶解模型的影响,探讨基因治疗人工关节假体周围骨溶解的可能性. 方法 设计沉默TNF-a的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)编码序列的引物,扩增后利用RAPAD腺病毒包装系统将该序列载入腺病毒,并构建出E1、E3区双缺失的重组腺病毒Ad5-TNF-α-siRNA-CMVeGFP.取8～l0周龄SPF级BABL/C雌性小鼠64只,体重20～25 g,随机分为4组(n=16).空白对照组(A组)制备假体模型,颗粒对照组(B组)、空病毒组(C组)、治疗组(D组)制备假体松动骨溶解模型;造模第2周开始向关节腔内分别注入以下溶液(两次各注射40 μL):A组注入PBS溶液,24 h后再次注入;B、C、D组注入钛颗粒悬浊液,24 h后分别注入PBS溶液、腺病毒Ad5 E1-CMVeGFP溶液(1×109 PFU/mL)、重组腺病毒Ad5-TNF-α-siRNA-CMVeGFP溶液(1×109 PFU/mL);每隔2周重复1次至第10周.术后观察小鼠一般情况,术后12周取材进行组织学观察及Westernblot检测TNF-t表达. 结果 目的基因载入腺病毒载体后经双切酶鉴定及DNA测序确定获得阳性克隆,重组腺病毒Ad5-TNF-α-siRNA-CMVeGFP成功转染HEK293细胞.术后各组小鼠均存活至实验完成.组织学观察示,A组炎性细胞及破骨细胞少,骨质形成良好;B、C组见大量炎性细胞浸润,破骨细胞多,骨质破坏明显;D组少量炎性细胞浸润,破骨细胞较B、C组少,未出现明显骨质破坏.各组界膜厚度及破骨细胞计数均为A组＜D组＜B组＜C组,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).Western blot检测显示各组均有TNF-αt表达,A、B、C、D组TNF-α表达量分别为0.235±0.022、0.561±0.031、0.731±0.037、0.329±0.025,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 成功构建沉默TNF-α的重组腺病毒,并可有效沉默小鼠假体周围组织中TNF-α的表达,从而抑制骨溶解.
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