期刊简介
本刊是由卫生部主管，中国康复医学会、华西医科大学附属第一医院主办，中国修复重建外科杂志编辑委员会编辑出版的跨学科的医学专业性学术期刊。主要刊登骨科、手外科、显微外科、整形外科、颌面外科、普外科、泌尿外科、神经外科、妇产科、五官科等各临床学科、研究室，无论是采用手术方法进行组织、器官的移植与移位，采用生物制品或非生物制品进行植入或替代，以及采用非手术方法等，进行组织结构的修复、重建功能、改善外形等有关的学术论文、临床经验总结、基础研究、有前瞻性见解的个案报道，有关的新技术、新疗法、经验教训、专题讲座、专题讨论、国外最新文献摘要等。
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首页>中国修复重建外科杂志
- 杂志名称：中国修复重建外科杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
- 主办单位：中国康复医学会,四川大学
- 国际刊号：1002-1892
- 国内刊号：51-1372/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：四川省首届科技期刊评比编辑加工奖期刊收录：JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
hVEGF_(165)及hBMP-7共表达重组腺相关病毒载体的体外生物学活性研究
时志斌；樊立宏；强辉；唐一仑；王坤正；党晓谦
关键词：重组腺相关病毒载体, hVEGF_(165), hBMP-7, 共表达, 生物学活性
摘要：目的 通过体外实验探讨hVEGF_(165)和hBMP-7共表达重组腺相关病毒载体(recombinant adeno-associated virus,rAAV)体外生物学活性,为体内应用其进行骨坏死的基因治疗奠定理论基础. 方法 分别采用rAAV-hVEGF_(165)-内部核糖体进入位点序列(internal ribosome entry site,IRES)-hBMP-7(实验组)、绿色荧光蛋白(green fluores-cent protein,GFP)标记的rAAv-IRES-GFP(对照组)转染体外培养的第3代兔BMSCs,于转染后1、2、3、7及14 d应用ELISA法及转染后14 d应用Western blot法鉴定两组hVEGF_(165)和hBMP-7表达;转染后14 d行细胞免疫荧光染色观察hVEGF_(165)和hBMP-7表达一致性.应用第3代人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)管状血管形成实验检测hVEGF_(165)蛋白活性.取第3代BMSCs行诱导成骨实验,Gomori钙钴法ALP染色及茜素红法钙盐染色检测hBMP-7蛋白活性. 结果 ELISA检测示随转染时间延长,两组hVEGF_(165)和hBMP-7表达逐渐升高;实验组各时间点hVEGF_(165)和hBMP-7表达量均明显高于对照组(P＜0.05).Western blot检测示实验组可见hVEGF_(165)和hBMP-7表达,对照组未见阳性表达.细胞免疫荧光染色观察示实验组hVEGF_(165)和hBMP-7染色呈阳性,表达部位和强度具有较好一致性;对照组未见阳性表达.HUVEC管状血管形成实验示实验组HUVEC拉长变形、出芽且相互交联成管状样结构;与对照组相比,管状血管数比较差异有统计学意义(P＜0.05).ALP染色见实验组细胞出现深染颗粒,对照组细胞内浅着色;与对照组相比,矿化结节数比较差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 双基因共表达rAAV-hVEGF_(165)-IRES-hBMP-7体外具有良好的生物学活性.
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