期刊简介

               本刊是由卫生部主管,中国康复医学会、华西医科大学附属第一医院主办,中国修复重建外科杂志编辑委员会编辑出版的跨学科的医学专业性学术期刊。主要刊登骨科、手外科、显微外科、整形外科、颌面外科、普外科、泌尿外科、神经外科、妇产科、五官科等各临床学科、研究室,无论是采用手术方法进行组织、器官的移植与移位,采用生物制品或非生物制品进行植入或替代,以及采用非手术方法等,进行组织结构的修复、重建功能、改善外形等有关的学术论文、临床经验总结、基础研究、有前瞻性见解的个案报道,有关的新技术、新疗法、经验教训、专题讲座、专题讨论、国外最新文献摘要等。                

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  • 杂志名称:中国修复重建外科杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
  • 主办单位:中国康复医学会,四川大学
  • 国际刊号:1002-1892
  • 国内刊号:51-1372/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:四川省首届科技期刊评比编辑加工奖期刊收录:JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
中国修复重建外科杂志2009年第08期

乳猪窦房结细胞原代培养及与Col Ⅰ纤维支架复合培养实验研究

万居易;钟晓琳;廖斌;王明勇;邓明彬

关键词:窦房结, 细胞培养, 差速贴壁技术, 5-Brdu, ColⅠ纤维支架, 猪
摘要:目的 对乳猪窦房结所在部位进行准确定位,建立一套可靠的窦房结细胞取材、分离、纯化培养技术;观察窦房结细胞与Col Ⅰ纤维支架的相容性. 方法 24h内新生纯种长白山乳猪5只,雌雄不拘,体重0.45~0.55 kg.实验动物采用多导电生理记录仪标记房波早出现的部位,在该位置取材行原代窦房结细胞培养,分别采用常规方法 培养和差速贴壁分离技术、5-BrdU处理纯化培养;于左心房部位取材行心房肌细胞纯化培养作为对照.倒置显微镜观察细胞形态、细胞贴壁时间、单细胞出现搏动时间、搏动频率等.将纯化培养的窦房结细胞以5 × 105个/mL密度接种至经预湿处理的Col ×纤维支架复合培养5 d,行HE染色观察及扫描电镜观察. 结果 房波早出现的位置即为窦房结所在部位.纯化培养的窦房结细胞有3种形态,即梭形、三角形与不规则形,其中梭形细胞多;心房肌细胞主要为三角形及不规则形,而无梭形细胞.窦房结细胞纯化培养与常规培养比较,梭形细胞所占比例分别为73.0%±2.9%、44.7%±2.3%,二者差异有统计学意义(P<0.01);不规则形细胞分别为7.0%±1.7%、36.1%±2.6%,二者差异有统计学意义(P<0.01);三角形细胞分别为20.0%±2.1%、19.2%±2.5%,二者差异无统计学意义(P>0.05).窦房结细胞复合Col Ⅰ纤维支架培养5 d,HE染色观察示Col Ⅰ纤维支架材料中有大量细胞;扫描电镜见细胞成团吸附于支架表面及孔隙侧壁,并可见细胞间通过突起相互连接,或伸出伪足贴附于支架孔隙壁上. 结论 通过准确窦房结定位,采用差速贴壁结合5-BrdU处理的纯化培养可明显提高乳猪窦房结梭形细胞比例,是一种可靠的窦房结细胞纯化培养技术.窦房结细胞和Col Ⅰ纤维支架有较好的细胞相容性.