期刊简介
本刊是由卫生部主管,中国康复医学会、华西医科大学附属第一医院主办,中国修复重建外科杂志编辑委员会编辑出版的跨学科的医学专业性学术期刊。主要刊登骨科、手外科、显微外科、整形外科、颌面外科、普外科、泌尿外科、神经外科、妇产科、五官科等各临床学科、研究室,无论是采用手术方法进行组织、器官的移植与移位,采用生物制品或非生物制品进行植入或替代,以及采用非手术方法等,进行组织结构的修复、重建功能、改善外形等有关的学术论文、临床经验总结、基础研究、有前瞻性见解的个案报道,有关的新技术、新疗法、经验教训、专题讲座、专题讨论、国外最新文献摘要等。
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首页>中国修复重建外科杂志

- 杂志名称:中国修复重建外科杂志
- 主管单位:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
- 主办单位:中国康复医学会,四川大学
- 国际刊号:1002-1892
- 国内刊号:51-1372/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:四川省首届科技期刊评比编辑加工奖期刊收录:JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
腺病毒介导的生长分化因子5基因对hBMSCs成骨分化的影响
程相俊;刘浩;张霆;黄巧蓉
关键词:生长分化因子5, hBMSCs, 重组腺病毒, 分化, 基因治疗
摘要:目的 利用重组腺病毒载体将生长分化因子5(growth and differentiation factor 5,GDF-5)基因导入hBMSCs,研究GDF-5基因的表达和对hBMSCs成骨分化的影响. 方法 将重组腺病毒GDF-5(adenovirus GDF-5,Ad-GDF-5)[含绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记]和空载腺病毒Ad-GFP进行扩增并测定滴度,并以不同滴度两种病毒感染第3代hBMSCs,干预后2 d荧光显微镜下观察GFP表达情况,RT-PCR检测GDF-5在hBMSCs中的表达.取第3代贴壁hBMSCs随机分为4组:实验组(GDF-5基因转染组)、成骨诱导组、空载组和对照组.于干预后不同时间行倒置相差显微镜观察、荧光显微镜观察、荧光定量RT-PCR、免疫荧光染色和von Kossa染色检测细胞分化情况. 结果 Ad-GDF-5滴度为1.0 × 109 pfu/mL,Ad-GFP滴度为1.2×109pfu/mL.Ad-GDF-5及Ad-GFP均能对hBMSCs有效感染,并使其表达目的 基因和GFP基因.干预后1~7 d实验组和成骨诱导组hBMSCs细胞形态及生长方式向成骨细胞转化,而对照组和空载组hBMSCs仍保持原有形态及生长方式.荧光定量RT-PCR检测示,干预后4 d实验组GDF-5基因表达明显高于其余各组(P<0.05);实验组和成骨诱导组ALP、Col Ⅰ、骨钙素基因表达均高于空载组和对照组(P<0.05),成骨诱导组Col Ⅰ基因表达高于实验组(P<0.05).干预后4 d,免疫荧光染色示成骨诱导组和实验组细胞表达并分泌Col Ⅰ,空载组和对照组细胞未见Col Ⅰ表达.干预后10 d,成骨诱导组和实验组细胞von Kossa染色为阳性,对照组和空载组为阴性. 结论 GDF.5基因可通过腺病毒载体导入hBMSCs稳定表达,并促使其成骨分化,为进一步研究这种转基因hBMSCs修复骨组织奠定了基础.
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