期刊简介

               本刊是由卫生部主管,中国康复医学会、华西医科大学附属第一医院主办,中国修复重建外科杂志编辑委员会编辑出版的跨学科的医学专业性学术期刊。主要刊登骨科、手外科、显微外科、整形外科、颌面外科、普外科、泌尿外科、神经外科、妇产科、五官科等各临床学科、研究室,无论是采用手术方法进行组织、器官的移植与移位,采用生物制品或非生物制品进行植入或替代,以及采用非手术方法等,进行组织结构的修复、重建功能、改善外形等有关的学术论文、临床经验总结、基础研究、有前瞻性见解的个案报道,有关的新技术、新疗法、经验教训、专题讲座、专题讨论、国外最新文献摘要等。                

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  • 杂志名称:中国修复重建外科杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
  • 主办单位:中国康复医学会,四川大学
  • 国际刊号:1002-1892
  • 国内刊号:51-1372/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:四川省首届科技期刊评比编辑加工奖期刊收录:JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
中国修复重建外科杂志2007年第06期

绿色荧光蛋白标记基因体内示踪骨髓间充质干细胞的分化

胡运生;马保安;李文海;张勇;范清宇

关键词:组织工程骨, 骨髓间充质干细胞, 腺病毒载体, 绿色荧光蛋白, 兔
摘要:目的 利用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记技术,观察组织工程骨在体内形成过程中种子细胞的变化与转归.方法 Adeno-XTM-GFP扩增和纯化后,测定病毒滴度,感染新西兰大白兔骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs),倒置相差显微镜观察细胞形态变化,并在荧光显微镜下观察GFP表达情况.确认标记成功后,将其与未标记的兔MSCs共同成骨诱导培养3周后,接种于磷酸钙骨水泥(calcium phosphate cement,CPC)-纤维蛋白胶(fibrin glue,FG)复合支架材料,构建组织工程骨作为实验组,回植于供体兔皮下.单纯CPC-FG复合支架材料植入对称部位作为对照.术后1、2、3周行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性测定;4周,激光共聚焦显微镜下对GFP进行示踪观察和Ⅰ型胶原、骨钙素(osteocalcin,OC)免疫组织化学检测成骨细胞功能蛋白,Masson染色观察新骨形成.结果 Adeno-XTM-GFP经扩增和纯化后,病毒噬菌斑形成,测得病毒滴度为3×108 pfu/ml.Adeno-XTM-GFP感染MSCs后96 h,可见GFP表达,感染率达50%~70%,细胞分裂增殖基本正常.术后1、2、3周,实验组ALP活性分别为12.546±1.091、16.567±0.659和20.443±0.706,对照组分别为0.453±0.113、0.243±0.018和0.308±0.056,差异有统计学意义(P<0.05).4周,实验组大体可见组织工程新骨形成,对照组未见新骨形成;组织学显示实验组新生骨小梁围绕材料孔隙形成,CPC-FG复合支架材料部分降解;实验组Ⅰ型胶原、OC免疫组织化学结果阳性,对照组未见阳性染色;实验组可见新生组织内有GFP标记的细胞.结论 组织工程骨组织结构与松质骨小梁类似,新生组织表达GFP,提示组织工程骨组织的形成来源于接种的细胞.