期刊简介
本刊是由卫生部主管，中国康复医学会、华西医科大学附属第一医院主办，中国修复重建外科杂志编辑委员会编辑出版的跨学科的医学专业性学术期刊。主要刊登骨科、手外科、显微外科、整形外科、颌面外科、普外科、泌尿外科、神经外科、妇产科、五官科等各临床学科、研究室，无论是采用手术方法进行组织、器官的移植与移位，采用生物制品或非生物制品进行植入或替代，以及采用非手术方法等，进行组织结构的修复、重建功能、改善外形等有关的学术论文、临床经验总结、基础研究、有前瞻性见解的个案报道，有关的新技术、新疗法、经验教训、专题讲座、专题讨论、国外最新文献摘要等。
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首页>中国修复重建外科杂志
- 杂志名称：中国修复重建外科杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
- 主办单位：中国康复医学会,四川大学
- 国际刊号：1002-1892
- 国内刊号：51-1372/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：四川省首届科技期刊评比编辑加工奖期刊收录：JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
重组人骨形成蛋白4基因腺相关病毒载体的构建
董智勇；郑召民；邝冠明；李佛保
关键词：骨组织工程, 重组人骨形成蛋白, 腺相关病毒
摘要：目的 构建重组人骨形成蛋白4(human bone morphogenetic protein 4,hBMP-4)基因腺相关病毒载体. 方法 根据hBMP-4的基因序列设计引物,上游引入EcoR Ⅰ位点,下游引入Sal Ⅰ位点,以EX-A0242-M01-hBMP-4为模板扩增目的基因.将hBMP-4基因克隆入pUC18载体中,获得重组质粒pUC18-hBMP-4.然后用EcoR Ⅰ与Sal Ⅰ酶切pUC18-hBMP-4及质粒pSNAV,回收酶切片段,T4 DNA连接酶16 ℃过夜,转化大肠杆菌DH5α感受肽细胞,筛选阳性克隆获得pSNAV-hBMP-4,EcoR Ⅰ/SalⅡ双酶切鉴定,并行全基因测序.转染BHK21细胞,G418筛选培养,获得抗药克隆细胞株.HSV1-rc/△UL2感染,包装此细胞株并收获病毒载体AAV-hBMP-4.行DNA点杂交法测定病毒滴度,SDS-PAGE分析判断病毒纯度.结果 PCR电泳及酶切鉴定表明,pSNAV-hBMP-4重组成功,基因测序显示装入pSNAV质粒中的hBMP-4基因正确;AAV-hBMP-4病毒的大致滴度为1.5×1012 μg/ml,分泌蛋白浓度为0.124 mg/ml,病毒载体纯度在95%以上.结论 实验获得的病毒载体滴度高、感染性好,可以满足骨组织工程的需要.
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