期刊简介
本刊是由卫生部主管，中国康复医学会、华西医科大学附属第一医院主办，中国修复重建外科杂志编辑委员会编辑出版的跨学科的医学专业性学术期刊。主要刊登骨科、手外科、显微外科、整形外科、颌面外科、普外科、泌尿外科、神经外科、妇产科、五官科等各临床学科、研究室，无论是采用手术方法进行组织、器官的移植与移位，采用生物制品或非生物制品进行植入或替代，以及采用非手术方法等，进行组织结构的修复、重建功能、改善外形等有关的学术论文、临床经验总结、基础研究、有前瞻性见解的个案报道，有关的新技术、新疗法、经验教训、专题讲座、专题讨论、国外最新文献摘要等。
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首页>中国修复重建外科杂志
- 杂志名称：中国修复重建外科杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部 计划生育委员会
- 主办单位：中国康复医学会,四川大学
- 国际刊号：1002-1892
- 国内刊号：51-1372/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：四川省首届科技期刊评比编辑加工奖期刊收录：JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 剑桥科学文摘, 万方收录(中), 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
体外诱导家猪骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化
邹立津；吕农华；冯文周；邹学农
关键词：骨髓间充质干细胞, 成骨细胞, 分化, 基因表达, 猪
摘要：目的 观察家猪骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)在体外诱导条件下成骨分化的特征及相关基因的表达.方法 选取3月龄雌性长白猪6头,无菌条件下于胫骨近端抽取骨髓15 ml.采用密度梯度离心法并根据细胞贴壁特性对MSCs进行分离、纯化,倒置相差显微镜观察原代细胞生长情况,于培养第7天计算MSCs百分比含量及群体倍增值.将第1代细胞置于含1×10-8 mmol/L地塞米松(dexamethasone,Dex)、10 mmol/L β-磷酸甘油(β-glycerophosphate,β-GP)和82 μg/ml抗坏血酸(ascorbic acid,Asc)的成骨诱导培养液中培养21 d,作为实验组;DMEM培养液中培养作为对照组.分别行细胞形态学观察、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)组织化学染色、钙沉积和细胞增殖测定,采用实时定量PCR分析成骨分化的相关基因表达.结果 原代MSCs特征:培养第1天,有核细胞大部分由悬浮的圆形血源性细胞组成;第3天换液弃除非贴壁细胞,MSCs克隆开始形成,细胞呈成纤维细胞样生长;第7天,镜下观察到大小不一的克隆.细胞在培养后12～14 d基本长满,原代细胞群体倍增值平均为13.MSCs成骨分化:诱导培养14 d实验组细胞形态由成纤维细胞样变成立方体样,而对照组细胞始终保持成纤维细胞样.培养5 d,对照组细胞计数为11 723±4 040,实验组为10 276±5 513,二者差异无统计学意义(P＞0.05).与对照组相比,实验组诱导培养14 d,ALP染色呈强阳性,21 d钙沉积明显增加(P＜0.01).实验组MSCs成骨相关基因:核心结合因子α1(core binding factor α1,Cbfα1)、osterix、ALP、Ⅰ型胶原、骨连接素(osteonectin,ON)、骨钙素(osteocalcin,OC)表达逐渐增强;Cbfα1、ALP、ON在分化早期增加明显;与第7天比较,第21天osterix和OC基因表达明显上调(P＜0.05);第14天,Ⅰ型胶原表达也上调(P＜0.05).结论 密度梯度离心法分离的猪MSCs,在体外诱导条件下能通过上调分化特异基因表达向成骨细胞分化.
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